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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4184
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-04-03
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4184 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
木霉屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Trichoderma spp. | LZR4184 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
細(xì)麗外擔(dān)菌Canine PLG (Plasminogen) ELISA Kit拉丁屬名: Exobasidium gracile
核盤菌Canine CRP (C-Reactive Protein) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
PhaeobotryonCanine Microalbumin ELISA Kit拉丁屬名: Phaeobotryon rhois
Microbacterium halotoleransCanine MYO (Myoglobin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母Canine ADORA1 (Adenosine A1 Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
黑曲霉Canine NA/NE (Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
巧克力糖霉菌Canine ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Glycomyces chocolcotum
黃曲霉Canine βMSH (beta-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus flavus
冠突曲霉Canine Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus cristatus
鞘氨單胞菌(加詞待譯)Canine PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
無(wú)花果曲霉Canine PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus ficuum
枯草芽孢桿菌Canine PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
秀珍菇Canine KIM-1 (Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
短小芽孢桿菌Canine BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus
釀酒酵母Canine CKMB (Creatine Kinase MB Isoenzyme) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
木霉屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商Anti-CK16 細(xì)胞角蛋白16Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NSDHL 類固醇脫氫酶樣蛋白NSDHL 規(guī)格 0.2ml
PVDF(Polyvinylidene Fluoride Membrane) PVDF膜/二氟化樹(shù)脂膜(膜孔徑:0.45um) 15X20cm
TRIM41 英文名稱: 環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激酶C蛋白 0.2ml
C9orf135 英文名稱: 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框135 0.2ml
Anti-CK16 細(xì)胞角蛋白16Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
小鼠標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒英文名稱:Mouse ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CCL4 英文名稱: 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β 0.1ml
Anti-DIO2 脫碘酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
IL-17 小鼠白介素-17Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MTLC 致癌基因 規(guī)格 0.2ml
C3c(Human Complement fragment 3c) ELISA Kit 人補(bǔ)體片段3c 96T
Phospho-SirT1 (Ser27) 英文名稱: 磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1 0.1ml
人破(Tetanus Ab)ELISA試劑盒英文名稱:Human Tetanus Antibody ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Staphylococal protein A,SPA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒 英文名稱:Human glucose-6-phosphate isomerase,GPI ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒英文名稱:Human glucokinase,GCK ELISA Kit特價(jià)促銷
人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒英文名稱:Human glucokinase regulatory protein,GKRP ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CXCL14(CXC-chemokine ligand 16) CXC趨化因子14抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-BCHE (CT) 丁酰膽堿酯酶(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
COX7A2 英文名稱: 細(xì)胞色素c氧化酶VIIA亞型2 0.1ml
Anti-Phospho-Numb (Ser276) 磷酸化膜相關(guān)蛋白NumbMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Anti-Phospho-HSP27 (Ser82)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化熱休克蛋白27IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-DRADA/ADAR1/FITC 熒光素標(biāo)記雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶(N端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CXCL9/MIG γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子 規(guī)格 0.1ml
Thymopentin 胸腺五肽 0.5mg
Prostate Specific Antigen 英文名稱: 激肽釋放酶3/舒素3 0.2ml