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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4196
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-04-03
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4196 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
皺紋毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Trichostrongylus rugatus | LZR4196 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
緊密毛霉Tn-I (Troponin I) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor strictus
固氮螺菌屬PAPPA (Pregnancy Associated Plasma Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Azospirillum humicireducens
谷氨酸棒狀桿菌ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum (Kinoshita et al.) Abe et al
鞘氨盒菌屬GLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingopyxis wooponensis
堅(jiān)硬芽孢桿菌IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus firmus
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
葡萄座腔菌IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Botryosphaeria dothidea
枯草芽孢桿菌FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
粉紅單端孢霉IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
檸檬黃色農(nóng)球菌TF (Serotransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Agrococcus citreus
油菜菌核病菌CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
溶桿菌GH (Growth Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Lysobacter sp.
Erwinia amylovoraIL-9 (Interleukin 9) ELISA Kit拉丁屬名: Erwinia amylovora
運(yùn)動節(jié)桿菌PCIII (Procollagen III) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter agilis
金龜子綠僵菌PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Metarhizium anisopliae
皺紋毛圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商TMIGD1 英文名稱： 跨膜TMIGD1蛋白 0.1ml
Anti-beta-Amyloid(25-35) β淀粉樣肽(25-35)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ET-1 英文名稱： 內(nèi)皮素1 0.1ml
非受體型酪氨酸蛋白激酶 Anti-SYK 0.1ml
Anti-TIMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶組織抑制因子-1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-LSP1 (Ser204) 磷酸化白細(xì)胞F肌動蛋白結(jié)合蛋白 規(guī)格 0.1ml
phospho-BAD(pSer128) 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CCR4 英文名稱： 細(xì)胞表面趨化因子受體4 0.1ml
Anti-IL-15RA 白介素15受體αMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit 人細(xì)胞癌抗原2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-HO-2 血紅素氧合酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MCP-2/CCL8 單核細(xì)胞趨化蛋白2 規(guī)格 0.2ml
PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體 96T
RBMX2 英文名稱： RNA結(jié)合蛋白X-連鎖蛋白2 0.1ml
AD7C-NTP 英文名稱： 神經(jīng)絲蛋白 0.2ml
Anti- Beta-arrestin 2/FITC 熒光素標(biāo)記β-抑制蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TG ELISA Kit 大鼠甲狀腺球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti- Beta-Amyloid(1-40)/FITC 熒光素標(biāo)記β淀粉樣肽(1-40)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FOXO3A 叉頭蛋白O3A 規(guī)格 0.2ml
AmAC-1 ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1 96T
NCR2 英文名稱： 細(xì)胞毒性受體NK-p44 0.2ml
CPLX1 英文名稱： Complexin I/復(fù)合素1 0.2ml
Anti-phospho-IRS1(Ser612) 磷酸化受體底物-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
cath-D(Human cathepsin D) ELISA Kit 人組織蛋白酶DMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Nox-4/NADH NADPH氧化酶4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IHH HHG2 規(guī)格 0.2ml
CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素 96T
phospho-AMPK alpha 2 (Ser173) 英文名稱： 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2 0.1ml
