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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4218
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-04-03
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4218 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
差異脲原體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Ureaplasma diversum | LZR4218 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
枯草芽胞桿菌枯草亞種PCT (Procalcitonin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
櫟小皮傘APLN (Apelin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
大腸埃希氏桿菌MMP-11 (Matrix Metalloproteinase 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
枯草芽孢桿菌EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
鍋孢霉ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
栗酒裂殖酵母ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
耐輻射奇球菌ApoC3 (Apolipoprotein C3) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus radiodurans
白僵菌用途: 害蟲生物防治
釀酒酵母BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
臭曲霉GROα/CXCL1 (Growth Regulated Oncogene Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus foetidus
冠突曲霉EPO (Erythropoietin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus cristatus
冷桿菌IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Cryobacterium arcticum
聚生殼菌IGF-1 (Insulin-Like Growth Factor 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
海洋桿菌IL-1α (Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Pontibacter sp.
膜醭畢赤酵母IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia membranifaciens
差異脲原體探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格人羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒英文名稱:Human hydroxyproline,Hyp ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人羥脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISA Kit特價(jià)促銷
Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Axin1 軸蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-AKT1/2/3 (Tyr315/316/312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3 規(guī)格 0.1ml
MMP-9 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
CD161 英文名稱: CD161 0.1ml
Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 磷酸化磷酯酶Cβ3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 人血紅素氧合酶2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NuMA 核有絲分裂器NuMA蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10 規(guī)格 0.2ml
GP-BB(Mouse Glycogen phosphorylase BB)ELISA Kit 小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB 96T
Prominin 2 英文名稱: 造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白 0.1ml
BAF53A 英文名稱: 肌動(dòng)蛋白樣蛋白6A 0.2ml
Anti-Runx3 Runx3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human sreum albumin,HSA ELISA Kit 人血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-Ret (Tyr1062) 磷酸化指狀蛋白R(shí)ETMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh H Cadherin/CDH13 鈣粘蛋白 規(guī)格 0.2ml
Gzms-B(Mouse granzymes B) ELISA Kit 小鼠顆粒酶B 96T
OTX2 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子OTX2 0.2ml
CREPT 英文名稱: 高表達(dá)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白 0.2ml
Anti-Integrin alpha 4/CD49d 整合素α4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
bullfrog growth hormone,GH ELISA Kit 蛙生長(zhǎng)激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光素標(biāo)記CD205IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CYP11A1/P450SCC 細(xì)胞色素P450 11A1 規(guī)格 0.1ml
Mouse IgM/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠IgM 0.3ml
Phospho-LIMK1(Thr508) + LIMK2(Thr505) 英文名稱: 磷酸化單絲酸蛋白激酶1/2 0.1ml