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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4167
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-04-03
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4167 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
剛地弓形蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Toxophasma gondii | LZR4167 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
大腸埃希氏桿菌Sheep EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
污黑腐皮殼Sheep APSA (Anti-Phosphatidyl Serine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Valsa sordida Nitschke
假單胞菌Sheep MYH1 (Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
小麥紋枯Sheep NUP133 (Nucleoporin 133kDa) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
熒光威克酵母Sheep PI3K (Phosphoinositide-3-Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Wickerhamia fluorescens
釀酒酵母Sheep A-CoA (Acetyl Coenzyme A) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Shinella kummerowiae Lin et al.Sheep AKA (Anti-Keratin Antibody) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
無色桿菌屬Sheep DCLK1 (Doublecortin Like Kinase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Achromobacter piechaudii
產(chǎn)蝦青素鞘鞍單胞菌Sheep SPTAN1 (Alpha-Fodrin) ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingomonas astaxanthinifaciens
針猴頭Sheep SOCS3 (Suppressors of Cytokine Signaling 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
庫爾勒海洋桿菌Sheep PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit 拉丁屬名: Pontibacter korlensis
外外安德倫茨氏菌Sheep CLL1 (Collectin Liver 1) ELISA Kit拉丁屬名: Lentzea waywayandensis
巴西果小克銀漢霉Sheep APA (Anti-Phospholipid Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Cunninghamella bertholletiae
指狀青霉Sheep MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium digitatum
黃須腹菌Sheep ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit 用途: 屬外生菌根菌
剛地弓形蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書人抗腎小管基底膜(TBM)ELISA試劑盒英文名稱:Human tubular basement membrane antibogy,TBM ELISA Kit特價(jià)促銷
人抗腎小球基底膜(GBM)ELISA試劑盒英文名稱:Human glomerular basement membrane antibogy,GBM ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人抗鼠(HAMA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human antimous antibody,HAMA ELISA 特價(jià)促銷
人抗雙鏈DNA/天然DNA(dsDNA)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-double stranded DNA,dsDNA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人抗髓磷脂IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha) 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
CCDCA 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白A 0.2ml
Anti-Kv1.3/PCN3 離子通道蛋白Kv1.3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
FPB(Human fibrinopeptide B) ELISA Kit 人血纖肽/纖維蛋白肽BMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PTGEs 素E合成酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HBAB/AKR1C2 膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2 規(guī)格 0.2ml
GDH/GLDH(Human Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit 人谷酸脫氫酶 96T
PUMA 英文名稱: p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子 0.1ml
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
GCS (glucosylceramide synthase, GCS) 葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PARP3 多腺苷二磷酸多聚酶3/多聚ADP-核糖聚合酶3 規(guī)格 0.2ml
NBL1 Kit Human 人 NBL1 / DAND1 / DAN ELISA配對(duì) ELISA
TRP1 英文名稱: 酪酸酶相關(guān)蛋白1 0.2ml
COPS4 英文名稱: 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4 0.2ml
Anti-Cathepsin H 組織蛋白酶HMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
BKCa channels(calcium-activated potassium channel) 鈣激活鉀通道蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CTSG/CG 組織蛋白酶GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHGA11 原鈣粘蛋白γA11 規(guī)格 0.2ml
SPARCL1 Kit Human 人 SPARCL1 / SPARC-like 1 ELISA配對(duì) ELISA
phospho-Tau protein (Ser579) 英文名稱: 磷酸化微管相關(guān)蛋白 0.1ml